Діагностичний тест ANA (антинуклеарні антитіла)

Тест на антинуклеарні антитіла (ANA) використовується як основний тест для оцінки стану пацієнта при аутоімунних порушеннях сполучної тканини. Це порушення, які вражають багато тканин і органів у всьому тілі. Що показують результати тесту? Що таке ANA? Які захворювання можна виявити ANA?

Зміст:

1. Тест ANA - що таке антинуклеарні антитіла?
2. Тест ANA - використання в діагностиці
3. Тест ANA - наявність ANA в крові здорових людей
4. Тест ANA - що таке ім'я?
5. Тест ANA - коли слід робити тест ANA?

Абревіатура ANA походить від англійської назви анти-ядерні антитіла, що перекладається на польську як "антинуклеарні антитіла". Ці молекули належать до білків, званих аутоантитілами, які є білками, які атакують організм, який їх виробляє.

Тест ANA - що таке антинуклеарні антитіла?

Людський організм має безліч захисних механізмів проти збудників хвороб. Один з них - гуморальний імунітет. В його основі лежить вироблення захисних антитіл. У здорових людей імунна система виробляє антитіла проти чужорідних антигенів.

Однак іноді трапляються ситуації, коли виробляються аутоантигени, спрямовані проти білків нашого власного організму. Цей процес є важливим для генезу аутоімунних захворювань.

Антинуклеарні антитіла атакують білки та інші молекули, що складають ядро.

Існує багато різних типів АНА. Розпад цих антитіл базується на типах ядерних компонентів, проти яких спрямовані ці молекули. Залежно від типу, АНА можуть зв’язуватися як з окремими білками, так і зі складними комплексами.

Наприклад, існують антитіла проти ядерних каналів та гістонів, тобто молекули, на які намотується ДНК.

АНАС, що атакує, можна розрізнити:

• КІТКА
• гістони
• рибонуклеопротеїди
• Ядерна РНК
• негістонові білки

Всі перераховані компоненти характерні для клітинного ядра.

АНА присутні в крові під час різних захворювань. Це включає аутоімунні розлади, рак та деякі типи інфекцій. Це дозволяє використовувати антинуклеарні антитіла в діагностиці певних захворювань.

Тест ANA - використання в діагностиці

Тест ANA використовується для виявлення антинуклеарних аутоантитіл у крові пацієнта. Це обстеження важливо для діагностики таких захворювань, як:

• системний червоний вовчак
• Синдром Шегрена
• склеродермія
• поліміозит
• дерматоміозит
• аутоімунний гепатит
• індукована реакція на лікарський засіб

Позитивний результат тесту ANA є діагностичним лише за наявності клінічних ознак, що підтверджують це. Тестування антинуклеарних антитіл також може бути корисним для моніторингу прогресування захворювання.

Типовими тестами, що використовуються для виявлення та оцінки ANA, є:

• непряма імунофлюоресценція
• ІФА-імуноферментний тест

Метод непрямої імунофлюоресценції

Непряма імунофлюоресценція є одним із найбільш часто використовуваних тестів ANA. Як правило, цей тест використовує клітини Hep-2. Їх наносять у вигляді тонкого шару на предметні стекла мікроскопа. Потім на них наносять сироватку і інкубують з клітинами Hep-2.

Якщо у відібраній пробі присутні АНА, вони виявляються після інкубаційного періоду у формі, пов’язаній з антигенами в ядрі клітини. Це можна побачити, додавши флуоресцентну мітку, яка зв’язується з антитілами.

Найчастіше для цього використовують флуоресцеїн або ізотіоціанат родопсину В (FITC) або родопсин В. Молекула флуоресцирує, коли на неї потрапляє пучок світла певної довжини хвилі. Для спостереження та оцінки флуоресценції використовується мікроскоп.

У клітинах HEp-2 можна спостерігати різні закономірності флуоресценції залежно від типу антитіл, що містяться в сироватці людини, та локалізації антигену. Їх аналіз дозволяє визначити типи антитіл, присутніх у зразку.

Рівень антитіл визначають шляхом проведення серійних розведень сироватки крові. Тест ANA вважається позитивним, якщо флуоресценція спостерігається при титрі 1: 40/1: 80. Однак результат вище 1: 160 має важливе діагностичне значення.

Імуноферментний аналіз (ІФА)

Імуноферментний аналіз (ІФА) використовує мікротитрувальні пластинки з антигенами для виявлення АНА. Кожна лунка пластини покрита одним або кількома антигенами. Це служить для виявлення специфічних антитіл.

Сироватка крові інкубується в лунках пластини, а потім промивається. Якщо у зразку були присутні антинуклеарні антитіла, вони залишаться зв’язаними з відповідними антигенами на мікротитраційній пластині після промивання.

На наступному етапі аналізу в лунку планшета додають друге, пов'язане з ферментом антитіло. Ферментативна реакція змушує розчин змінювати колір.

Різниця кольорів пропорційна кількості антиген-зв’язаних антитіл у лунці пластини. Колір отриманого розчину можна оцінити спектрофотометричним методом, тобто шляхом вимірювання інтенсивності світлового пучка, що проходить через розчин.

Тест ANA - наявність ANA в крові здорових людей

За підрахунками, у 5% людської популяції антинуклеарні антитіла присутні в крові у концентрації, яка вважається діагностично важливою, незалежно від наявності стану захворювання.

Оскільки частота ANA зростає з віком, близько 10-37% здорових людей у ​​віці старше 65 років виявляють позитивний результат на наявність ANA. Такі випадки частіше зустрічаються у жінок, ніж у чоловіків.

Тест ANA - що таке ім'я?

Характерним значенням для тесту ANA є титр. Це вказує на ступінь розбавлення сироватки, при якій антинуклеарні антитіла стають невизначуваними. Чим вища концентрація ANA в крові, тим вищий титр присутній у результатах тесту.

Тест на специфічність антинуклеарних антитіл рекомендується проводити, якщо титр вище 1: 160. Ці додаткові тести слід проводити разом із аналізом клінічної історії хвороби та фізичним обстеженням. Мета цих кроків - діагностувати або виключити аутоімунні розлади.

Однак слід зазначити, що такий результат спостерігається у 5% пацієнтів, незалежно від стану захворювання. Результат тесту є діагностичним лише тоді, коли є інші симптоми захворювання.

Негативний результат тесту ANA вказує на те, що у пацієнта навряд чи є вовчак або інше аутоімунне захворювання.

Тест ANA - коли слід робити тест ANA?

Тест ANA призначається, коли симптоми пацієнта вказують на системний аутоімунний розлад. Вони можуть бути дуже неочевидними та неспецифічними, а з часом можуть змінюватися.

Приклади симптомів включають:

• Лихоманка низького ступеня
• Стійка втома
• Біль, схожий на артрит
• Червоний висип
• Чутливість шкіри до світла
• Втрата волосся
• Біль у м’язах
• Оніміння або поколювання в руках або ногах
• Запалення органів і тканин (нирок, легенів, серця, серцевої оболонки, центральної нервової системи або судин)

Література:

1. https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
2. "Медичні предметні рубрики". Національна медична бібліотека. 12 лютого 2013 р.
3. "Тест на антинуклеарні антитіла: що це означає". Фонд Вовчак Америки. Процитовано 7 червня 2013
4. Кумар, Y; Бхатія, А; Мінц, RW (2 січня 2009 р.). "Антинуклеарні антитіла та методи їх виявлення в діагностиці захворювань сполучної тканини: подорож, переглянута". Діагностична патологія
5. www.autopróbciala.info
6. Кавано, Артур, Томар, Рассел, Ревель, Джон, Соломон, Даніель Х. та ін. Настанови щодо клінічного використання тесту на антинуклеарні антитіла та тести на специфічні аутоантитіла до ядерних антигенів. Архіви патології та лабораторної медицини. 124 (1), с. 71-81, січень 2000 р

Про автора

Сара Яновська, магістр, докторант міждисциплінарних докторських студій у галузі фармацевтичних та біомедичних наук Люблінського медичного університету та Інституту біотехнологій у Білостоці. Вона здобула ступінь магістра, захистивши дисертацію у галузі фармацевтичної ботаніки щодо антиоксидантних властивостей екстрактів, отриманих із двадцяти видів мохів. В даний час у своїй дослідницькій роботі він займається синтезом нових протиракових речовин та вивченням їх властивостей на клітинних лініях раку. Два роки вона працювала магістром фармації у відкритій аптеці.

Прочитайте більше від цього автора