Антинуклеарні антитіла (ANA)

Антинуклеарні антитіла є частиною складного діагностичного процесу системних захворювань сполучної тканини. Складний механізм утворення антинуклеарних антитіл ускладнює інтерпретацію їх результатів, і наявність або відсутність певного антитіла не завжди свідчить про процес захворювання. Які типи антинуклеарних антитіл? Коли слід проводити тест?

Зміст:

1. Антинуклеарні антитіла - типи
2. Антинуклеарні антитіла - утворення та механізм дії
3. Антинуклеарні антитіла - показання до дослідження
4. Антинуклеарні антитіла - що таке тест?
5. Антинуклеарні антитіла - як інтерпретувати результат?

Антиядерні антитіла (АНА) - це аутоантитіла, спрямовані проти елементів клітинного ядра, наприклад, ДНК та цитоплазми. Вони є одними з найрізноманітніших і найбільш вивчених антитіл.

Антинуклеарні антитіла - типи

• антитіла проти витяжних ядерних антигенів (анти-ЕНА):
• проти ДНК-топоізомерази I (анти-Scl70)
• проти рибонуклеопротеїну (анти-RNP)
• проти антигену Сміта (анти-Sm)
• анти-Мі2 / Мі-2
• анти-Ro (SS-A)
• анти-Ла
• анти-Jo1
• анти-PM-Scl
• анти-кн
• антитіла проти ядерного пороутворюючого білка gp-2010 (anti-gp-210)
• антитіла проти нативної дволанцюжкової ДНК (анти-dsDNA)
• антицентромерні антитіла (анти-АСА)

Антинуклеарні антитіла - утворення та механізм дії

Аутоімунітет - це аномальна реакція імунної системи на власні тканини, що призводить до появи аутоімунних захворювань.

Описано різні механізми аутоімунітету, одним з яких є вивільнення антигенів, прихованих від імунної системи, наприклад, в результаті запального ураження тканин.

Потім виділяються елементи, що знаходяться в ядрі клітини, наприклад, ДНК, РНК, гістони, які імунна система починає розпізнавати як щось чужорідне і виробляє проти них ядерні антитіла.

Антинуклеарні антитіла - показання до дослідження

• підозра на захворювання сполучної тканини:
• системний червоний вовчак (наявність антитіл у 95-100% пацієнтів; антитіла проти dsDNA є специфічним маркером захворювання)
• індукований ліками вовчак (95-100% пацієнтів)
• антифосфоліпідний синдром (40-50% пацієнтів)
• системна склеродермія (80-95% пацієнтів, особливо антитіла проти Scl70)
• поліміозит та дерматоміозит (40-80% пацієнтів, особливо антитіла проти Jo1 та анти-Mi2)
• Синдром Шегрена (48-96% пацієнтів, особливо анти-Ro та анти-La антитіла)
• ревматоїдний артрит (близько 10% пацієнтів)
• ювенільний ідіопатичний артрит (менше 10% пацієнтів)
• Синдром Рейно (20-60% пацієнтів)
• фіброміалгія (15-25% пацієнтів)
• змішані захворювання сполучної тканини (95-100% пацієнтів)
• оцінка активності захворювання та моніторинг ефективності лікування, наприклад антитіла проти dsDNA в системному червоному вовчаку
• кореляція присутності антитіл із появою специфічних симптомів захворювання, наприклад, синдрому Шегрена та наявності антитіл проти Ro-і-La
• прогнозування захворювання на майбутнє

Антинуклеарні антитіла - що таке тест?

Кров, взята з ліктьового згину натщесерце, використовується для визначення антинуклеарних антитіл.

Методи, що використовуються для визначення антитіл, дуже різні і залежать від типу антинуклеарного антитіла, що вимірюється. В основному це такі імунологічні методи, як:

• ІФА
• RIA
• непряма імунофлюоресценція
• метод подвійної імунодифузії
• вестерн-блот

У разі антинуклеарних антитіл застосовується двоступенева діагностика. Спочатку проводиться скринінговий тест із використанням методу непрямої імунофлюоресценції, який характеризується високою чутливістю.

Метод непрямої імунофлуоресценції полягає в іммобілізації клітин HEp-2, отриманих з епітеліальних клітин людини, на предметному склі мікроскопа.

Клітини цієї лінії містять у своїй цитоплазмі та клітинному ядрі антигени, які зв’язують патологічні антитіла з кров’ю пацієнта.

Після додавання сироватки пацієнта на предметне скло антинуклеарні антитіла зв’язуються зі специфічними антигенами і видно під мікроскопом завдяки спеціальним флуоресцентним маркерам.

Перевагою непрямої імунофлуоресценції є можливість диференціації типів антитіл на основі типу освітленості флуоресцентного барвника.

Наприклад, світіння ядра однорідного типу вказує на наявність анти-dsDNA або анти-ssDNA антитіл.

Позитивний результат скринінгового тесту завжди повинен бути підтверджений. Для цього використовуються дуже специфічні імунологічні методи, наприклад вестерн-блот. Після виявлення присутності та ідентифікації типу антинуклеарного антитіла визначається його титр, тобто найбільше розведення сироватки, при якому можна виявити наявність антитіл.

Антинуклеарні антитіла - як інтерпретувати результат?

Правильний титр антинуклеарних антитіл повинен бути нижче 1:40.

Якщо скринінговий тест на антинуклеарні антитіла є негативним і відсутні клінічні симптоми, що свідчать про системне захворювання сполучної тканини, діагноз не слід поширювати, включаючи специфічні антитіла, наприклад, анти-dsDNA, anti-Sm.

Клінічно значущими титрами у дорослих вважаються ≥ 1: 160, а у дітей ≥ 1:40.

У разі позитивних результатів пропонується інтерпретувати результат тесту таким чином:

• титр 1: 40-1: 80 - прикордонний результат (слабо позитивний), за відсутності клінічних симптомів захворювань сполучної тканини не рекомендується повторювати тест або проводити подальший тест, оскільки результати у більшості людей не змінюються з роками
• титр 1: 160-1: 640 - середньо позитивний результат, за відсутності клінічних симптомів захворювань сполучної тканини тест рекомендується повторити через 6 місяців
• титр ≥ 1: 1280 - високий позитивний результат, при наявності клінічних симптомів захворювань сполучної тканини для діагностики захворювання потрібна подальша діагностика фахівця

Слід мати на увазі, що серологічне дослідження на антинуклеарні антитіла є частиною складного діагностичного процесу, і позитивний результат завжди слід інтерпретувати в контексті клінічної картини та наявності характерних симптомів захворювання.

Антинуклеарні антитіла з низьким титром виявляються у 5% здорового населення, і їх частота зростає з віком.

Крім того, їх наявність виявляється у фізіологічних та патофізіологічних станах, при яких антинуклеарні антитіла не мають діагностичного значення:

• інфекції, наприклад туберкульоз, сифіліс, малярія
• захворювання печінки, наприклад цироз печінки
• захворювання легенів, наприклад, саркоїдоз, азбестоз
• рак, наприклад, лейкемія, лімфома, рак молочної залози, меланома
• шкірні захворювання, наприклад, псоріаз, плоский лишай
• після трансплантації органів, наприклад, трансплантації серця, трансплантації нирки
• використання ліків, наприклад протиепілептичних препаратів, гідралазину, солей літію,
• інші аутоімунні захворювання, наприклад, хвороба Хашимото, хвороба Аддісона, діабет I типу
• вагітність (до 20% вагітних)

Варто знати ...

Етнічна варіація характеризує появу різних типів антинуклеарних антитіл.

Наприклад, у кавказьких пацієнтів із системним склерозом частіше спостерігаються антитіла проти АСА, а у афроамериканців та африканців - антитіла, реагуючі на топоізомеразу.

Рекомендована стаття:

Діагностичний тест ANA (антинуклеарні антитіла)

Література

1. Фішер К. та ін. Аутоантитіла в ревматологічній практиці. Форум Реуматол. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Внутрішні хвороби, під редакцією Щеклік А., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Лабораторна діагностика з елементами клінічної біохімії. Посібник для студентів-медиків під редакцією Дембіньска-Кієч А. та Наскальскі Ю.В., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3-е видання

Про автора

Кароліна Карабін, доктор медичних наук, молекулярний біолог, лабораторний діагност, Cambridge Diagnostics Polska Біолог зі спеціалізацією з мікробіології та лабораторний діагност з більш ніж 10-річним досвідом у лабораторних роботах. Випускник Школи молекулярної медицини та член Польського товариства генетики людини, керівник наукових досліджень в лабораторії молекулярної діагностики при кафедрі гематології, онкології та внутрішніх хвороб Варшавського медичного університету. Захистила звання доктора медичних наук у галузі медичної біології на 1-му медичному факультеті Варшавського медичного університету. Автор багатьох наукових та науково-популярних праць у галузі лабораторної діагностики, молекулярної біології та харчування. Щодня, як фахівець у галузі лабораторної діагностики, він керує основним відділом Cambridge Diagnostics Polska та співпрацює з командою дієтологів у дієтичній клініці CD. Він ділиться своїми практичними знаннями з діагностики та дієтотерапії захворювань зі спеціалістами на конференціях, тренінгах, у журналах та на веб-сайтах. Її особливо цікавить вплив сучасного способу життя на молекулярні процеси в організмі.

Прочитайте більше статей цього автора